ACE色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20µm(5~10µm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
1、避免色譜柱反吹
通常,色譜柱不能反吹。只有當色譜柱操作說明書上注明色譜柱可以反吹時,才能進行反吹,以除去殘留在色譜柱頭上的雜質。否則,反吹色譜柱的作用是迅速降低色譜柱的效率。
2、避免流動相使用不當,損壞固定相
選擇合適的流動相(尤其是pH值)以避免損壞固定相。有時可以在進樣器前面連接一個前置柱。分析柱為鍵合硅膠時,前置柱為硅膠。因此,在進入分析柱之前,可以用硅膠將流動相“飽和”,以防止分析柱中的硅膠基質溶解。
3、禁止未經樣品處理直接進入色譜柱。
避免將含有復雜基質的樣品(尤其是生物樣品)直接注入色譜柱。有必要對樣品進行預處理或將進樣器連接到色譜柱。保護柱。保護柱通常是填充有類似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
4、不要將緩沖溶液長期存放在色譜柱中。
存放色譜柱時,用乙腈或甲醇填充色譜柱,并擰緊色譜柱接頭以防止溶劑蒸發和干燥。不要將緩沖溶液留在柱子中過夜或更長時間。
